Материал для исследования.
Для проведения анализа необходима венозная кровь в обьеме 1-3 мл в пробирке с ЭДТА.В пробирку с гепарином кровь набирать нежелательно.Кровь,взятую в пробирку с антикоагулянтом ,следует охладить,если не планируется ее обработка в течение 2-4 ч.Пробу транспортируют на льду.
Происхождение ретикулоцитов.
Дифференцировка клеток происходит из крови(соединительной ткани).Сначало образуется
Зигота → Бластомер → Эмбриобласт → Эпибласт → Клетка первичной мезодермы → Прегемангиобласт → Гемангиобласт → Гемоцитобласт →
Общий миелоидный прародитель → Проэритробласт → Мегалобласт → Полихроматический эритробласт → Нормоцит → Ретикулоцит(полихроматофильный эритроцит).
В результате созревания эритроцитов в костном мозге,они отторгают свои ядра и избавляются от органелл(рибосом и митохондрий),участвующих в синтезе гемоглобина и клеточного метаболизма.Ретикуолоциты(полихроматофильный эритроцит)-это незрелые,лишеные ядер эритроциты,содержащие в цитоплазме неполный "набор"гемоглобина.Термин ретикулоцит относиться к внешнему виду агрегированных базофильных рибосом в цитоплазме незрелых эритроцитов,проинкубированных с красителем.В процессе инкубации происходит сцепление красителя с рибосомами в незрелых эритроцитах и позволяет визуализировать ретикулоциты.
Физиологические особенности ретикулоцитов.
Ретикулоциты в крови у собак созревают быстрее,и обычно встречаются только агрегированные (сборные)ретикулоциты.
Ретикулоциты в крови у кошек созревают медленнее,чем у собак,и поэтому встречаются как агрегированные(сборные) ,так и зернистые (точечные)ретикулоциты.
При проведении анализа у кошек подчитывются как агрегированные,так и зернистые ретикулоциты.
Продолжительность жизни зернистых ретикулоцитов больше,чем у агрегированных(10-12 дней по сравнению с 12 ч).При подсчете учитываются как сборные,так и точечные ретикулоциты.Большое количество агрегированных клеток свидетельствует об активной регенерации,а наличие зернистых ретикулоцитов указывает о кумулятивной регенерации.Повышенное количество зернистых ретикулоцитов у кошек указывает на ответ костного мозга на анемию,произошедший 3-4 недели назад.
У кошек и собак с регенеративными анемиями из костного мозга будет высвобождаться большее количество ретикулоцитов.Отсутствие ретикулоцитов подтверждает наличие нерегенеративной анемии и позволяет предположить,что анемия обусловлена снижением образования эритроцитов.Для того,чтобы костный мозг ответил на анемию,требуется 3-4 дня,а максимиум полихромазия и ретикулоцитоз достигается через 1 неделю,поэтому после острого кровотечения или гемолиза повышение количества агрегированных ретикулоцитов может не наблюдаться.
Референсные значения.
В лаборатории НУКЛЕОМ результаты могут быть определены в абсолютном количестве ретикулоцитов.Абсолютное количество ретикулоцитов в микролитре крови считается наиболее надежным и полезным для диагностике образования ретикулоцитов костным мозгом.
СОБАКИ:Абсолютное количество ретикулоцитов<80000/мкл.
КОШКИ:Абсолютное количество ретикулоцитов<60000/мкл.
Патологическое изменения:Любое повышение референсного интервала указывает о регенеративном ответе на анемию.